【摘 要】
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探讨盐酸小檗碱对菌丝相白念珠菌细胞壁完整性的影响.以微量液基稀释法检测盐酸小檗碱对白念珠菌标准株与临床株的最低抑菌浓度(MIC);spot assay检测白念珠菌落形成;XTT法检
【机 构】
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安徽中医药大学中西医结合学院,安徽合肥230012;安徽省中医药科学院中西医结合研究所,安徽合肥230012;安徽中医药大学中药复方安徽省重点实验室,安徽合肥230012
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探讨盐酸小檗碱对菌丝相白念珠菌细胞壁完整性的影响.以微量液基稀释法检测盐酸小檗碱对白念珠菌标准株与临床株的最低抑菌浓度(MIC);spot assay检测白念珠菌落形成;XTT法检测白念珠菌丝代谢;荧光显微镜观察白念珠菌丝活力;扫描电镜观察白念珠菌丝形态;透射电镜观察白念珠菌丝细胞壁结构;流式细胞术检测白念珠菌细胞壁β-葡聚糖暴露程度;qRT-PCR法检测白念珠菌丝特异性基因ECE1及β-葡聚糖合酶调控基因FKS1和FKS2的表达.结果 显示,盐酸小檗碱对白念珠菌临床株及标准株的MIC为64～128 μg· mL-1;512 μg· mL-1盐酸小檗碱干预下能抑制白念珠菌落生长,64～512μg·mL-1盐酸小檗碱能抑制菌丝代谢,512 μg· mL-1盐酸小檗碱能抑制白念珠菌丝活力,256～512 μg,mL-1盐酸小檗碱能抑制形态转化,512 μg·mL-1盐酸小檗碱能明显损伤细胞壁结构,128～512 μg· mL-1盐酸小檗能促进细胞壁β-葡聚糖暴露,512 μg· mL-1盐酸小檗碱能下调白念珠菌丝特异性基因ECE1 2.72倍及β-葡聚糖合成酶调控基因FKS1与FKS2分别3.49,3.26倍.研究表明,一定浓度的盐酸小檗碱可能通过下调白念珠菌丝特异性基因及β-葡聚糖合成酶相关基因的表达,从而破坏白念珠菌细胞壁的结构并促使口-葡聚糖暴露,进而影响整个细胞壁的完整性.
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