【摘 要】
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目的 探讨长基因间非编码RNA 672(LINC00672)对微小RNA-629-3p(miR-629-3p)的靶向作用及胶质瘤细胞迁移侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响.方法 采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测
【机 构】
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惠州市中心人民医院神经外科,惠州市中心人民医院病理科,中山大学附属第一医院神经外科
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目的 探讨长基因间非编码RNA 672(LINC00672)对微小RNA-629-3p(miR-629-3p)的靶向作用及胶质瘤细胞迁移侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响.方法 采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测胶质瘤细胞(U118、U87和U251)以及人星形胶质细胞NHAs的LINC00672和miR-629-3p水平,经DIANA Tools在线预测和双荧光素酶报告基因实验验证LINC00672和miR-629-3p间的靶向关系.将U251细胞分为4组:空白对照组、阴性对照组(转染pcDNA)、LINC00672过表达组(转染pcDNA-LINC00672)和共过表达组(转染pcDNA-LINC00672+miR-629-3p模拟物mimics).MTT法、划痕实验和Tran-swell小室实验分别检测经转染处理后各组细胞的增殖、迁移和侵袭能力.qPCR与Western blotting检测EMT相关指标[E-钙黏蛋白(E-Cad)、N-钙黏蛋白(N-Cad)和纤维黏连蛋白(FN)]以及细胞周期依赖蛋白激酶2(CDK2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达情况.结果 与NHAs细胞相比,胶质瘤细胞的LINC00672水平降低,而miR-629-3p水平升高(P<0.05);LINC00672能够靶向负调控miR-629-3p.LINC00672过表达组U251细胞的增殖活力、划痕愈合率和穿膜细胞数较阴性对照组均明显降低(P<0.05);而共过表达组U251细胞的增殖活力、划痕愈合率和穿膜细胞数较LINC00672过表达组升高(P0.05).与阴性对照组相比,LINC00672过表达组U251细胞的E-Cad水平升高,而CDK2、MMP-9、N-Cad和FN水平降低(P<0.05);与LINC00672过表达组相比,共过表达组U251细胞的E-Cad水平降低,而CDK2、MMP-9、N-Cad和FN水平升高(P0.05).结论 LINC00672通过靶向调控miR-629-3p来抑制胶质瘤U251细胞的增殖、迁移侵袭和EMT过程,在胶质瘤中发挥抑瘤作用.
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