目的建立一种高效分离、培养大鼠胸主动脉血管内皮细胞的方法。方法用Wistar大鼠(200～250 g),无菌条件下开胸取胸主动脉,去除血管外膜,制备长约1.0～1.5 mm动脉环。将血管环垂直置于干燥的培养皿中,并向血管环内加入含有10%胎牛血清的DMEM/F12培养液、静止培养;24 h血管环贴壁后,加入培养液;3～4 d内皮细胞长出,弃血管环,并经0.25%胰蛋白酶消化传代。用形态学、免疫细胞化学及流式细胞分析等方法,鉴定血管内皮细胞标志物,vWF的表达。结果培养3～4 d时有细胞自主动脉环内迁移出并贴壁生长,细胞汇合后呈现典型的"铺路石"样内皮细胞特征;免疫组化和流式细胞分析结果示,vWF表达阳性率可高达98.3%±0.2%。结论用改良的植块培养方法,不需要胶原及内皮细胞生长补充物,较传统酶消化法更为经济、高效,且简便易行,适用于细小血管内皮细胞的分离与培养。