研究肌球蛋白轻链激酶(MLCK)在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠模型肠黏膜屏障变化中的作用，探讨肠黏膜屏障在NASH发病中的作用机制。
方法将C57BL/6小鼠随机分为正常饮食对照组、单纯性脂肪肝(NAFL)组、NAFL加MLCK特异性抑制剂ML–7组(NAFL＋ML–7组)，NASH组以及NASH＋ML–7组，每组为10只小鼠。HE染色法观察各组肝组织病理改变，免疫组化法测定小肠上皮中MLCK的表达，透射电镜观察小肠上皮细胞间紧密连接形态并测量细胞间隙宽度，ELISA法检测门静脉中内毒素脂多糖(LPS)浓度，测定外周血中转氨酶水平，ELISA和实时定量PCR法检测肝脏组织中炎性因子的浓度和mRNA表达。
结果NASH组小肠上皮细胞中MLCK表达量明显高于正常饮食对照组(P<0.01)。NASH组紧密连接结构紊乱，细胞间隙宽度显著大于正常饮食对照组[(26.60±1.20) nm比(14.90±0.33) nm，P<0.05]，给予MLCK抑制剂ML–7后(NASH＋ML–7组)，紧密连接结构恢复，细胞间隙宽度[(14.90±0.67)nm]较NASH组明显减小(P<0.05)。NASH组小鼠门静脉中LPS浓度显著高于正常饮食对照组[(7.260±3.184)U/L比(2.962±0.845)U/L，P<0.05]，NASH＋ML–7组门静脉中LPS浓度[(3.772±1.033)U/L]显著低于NASH组(P<0.05)。NASH组外周血ALT及AST水平明显高于正常饮食对照组(P均<0.05)，肝脏中炎性因子TNFα、IL–6浓度及TNFα、IFNγ、NF–κB的mRNA水平显著高于正常饮食对照组(P均<0.05)；给予MLCK抑制剂后(NASH＋ML–7组)，外周血ALT和AST水平、肝脏中TNFα和IL–6浓度、肝脏中TNFα和NF–κB的mRNA水平均显著低于正常饮食对照组(P均<0.05)。
结论NASH阶段小鼠肠黏膜通透性增加，MLCK可能在其中具有十分重要的调节作用，抑制MLCK后可以有效降低实验动物肠黏膜通透性，从而防治NASH。