HbTCTP及其截短体酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定

来源 :分子植物育种 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wdqbupt

【摘要】

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为进一步鉴定橡胶树翻译控制肿瘤蛋白(HbTCTP)与橡胶延伸因子1(HbREF1)互作的分子区域,构建HbTCTP及其截短体的诱饵载体.本研究利用RT-PCR技术从橡胶树胶乳中扩增出包含HbTCT

【作者】

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邓治胡燕玲岳镒繁代龙军杨洪李德军

【机构】

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中国热带农业科学院橡胶研究所,农业农村部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室,省部共建国家重点实验室培育基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室,海口,571101;南京农业大学农学院,南京,2100

【出处】

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分子植物育种

【发表日期】

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2020年16期

【关键词】

：

橡胶树(Hevea brasiliensis) HbTCTP 截短体诱饵载体酵母双杂交

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为进一步鉴定橡胶树翻译控制肿瘤蛋白(HbTCTP)与橡胶延伸因子1(HbREF1)互作的分子区域,构建HbTCTP及其截短体的诱饵载体.本研究利用RT-PCR技术从橡胶树胶乳中扩增出包含HbTCTP不同结构域的片段,克隆到pGBKT7表达载体,通过酶切、菌落PCR和测序鉴定后,转化酵母Y2HGo1d感受态细胞,检测诱饵蛋白是否具有自激活作用和毒性.结果显示,成功构建6个包含HbTCTP不同结构域的诱饵载体,且诱饵载体对酵母宿主细胞无毒性和无自主激活报告基因的功能.本研究结果为进一步筛选HbTCTP与HbREF1互作的分子区域及阐明HbTCTP的功能提供科学依据.

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