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采用单菌丝团法分离硬叶兜兰菌根真菌,纯化后,用打孔法培养菌株并观察形态特征并测定生长速度,初步鉴定了8株内生真菌（DJYYDL001、DJYYDL003、DJYYDL004、DJYYDL006、DJYYDL008、DJYYDL009、DJYYDL011、DJYYDL015）。结果表明：单菌丝团法分离出的菌丝团在恒温培养12h后镜检及吸取萌发菌丝团为最佳时间。没有经过升汞处理的根段菌丝团污染率最大,而处理2～3min后根段的菌丝团污染率最小。