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目的：建立一种新的测定二甲双胍有关物质的ＨPLC法。方法：采用色谱柱Polaris C18柱（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ）；检测波长２１８ｎｍ；流量１ｍｌ／ｍｉｎ，比较流动相中各有关因素对色谱行为的影响。结果：优选出适宜流动相为含０．０５ｍｍｌ／Ｌ十二烷基磺酸钠、１％三乙胺、０．０６６７ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾、５％乙腈、以６ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钾和磷酸调ｐＨ３．０的水。结论：采用本流动相系统，改善了二甲双胍与主要有关物质双氰胺的分离，提高了色谱分析适应性。