论文部分内容阅读
目的 探讨C57BL/6J小鼠的天然CD4~+CD25~+调节性T细胞(CD4~+CD25~+Treg)是否存在α7烟碱型乙酰胆碱受体(a7nAchR).方法 使用小鼠调节性T细胞试剂盒分离小鼠脾脏CD4~+CD25~+Treg,流式细胞术鉴定CD4~+CD25~+Treg的纯度.分别采用免疫荧光染色、共聚焦湿微镜、Western印迹和逆转录聚合酶链反应检测Treg表面α7nAchR蛋白/基因表达.结果 α-银环蛇毒素-FITC染色、流式检测显示Treg细胞表面结合α-银环蛇毒素-FITC;共聚焦显微镜成像观察到Treg细胞表面结合大量α-银环蛇毒素;Western印迹检测证实Treg细胞样本中检测到了清楚的α7nAchR条带,分子量大小约为55 kD;RT-PCR分析发现Treg细胞样本中检测到了199 bp大小的特异性α7nAchR目的 基因条带.结论小鼠天然CD4~+CD25~+Treg细胞表达α7nAChR.