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目的：建立基于DREAM设计和同源重组的简便、快速定点突变方法。方法：设计两条包含突变的反向PCR（inverse PCR）引物，使其5’端互补从而产生同源重组，同时使用DREAM设计方案在上述引物中引入限制性内切酶位点以便突变子筛选。用能扩增长片段的高保真耐热DNA聚合酶扩增全长的质粒DNA，直接转化大肠杆菌。转化到细菌中的全长质粒DNAPCR产物可利用其末端同源序列发生同源重组而环化。利用引入的酶切位点方便地进行突变子的筛选。结果：用该方法成功地对长度大于7kb的质粒进行了定点突变。结论：本定点突变无