丙型肝炎病毒全长cDNA克隆在Huh7细胞中的表达与复制

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目的了解丙型肝炎病毒(HCV)在体外的复制和表达情况.方法利用HCV全长cDNA克隆构建表达质粒p3.1HCV并转染Huh7细胞.应用RT-PCR,Western blotting分析病毒正、负链RNA,蛋白表达和剪切.结果在转染p3.1HCV的Huh7细胞中可栓出相应病毒的正、负链RNA、Western blotting在转染p3.1HCV的Huh7细胞检测中可检到针对HCV NS3蛋白、分子量约70kD的特异性条带.结论HCV可以在体外培养的Huh7细胞中复制且其前体蛋白能在Huh7细胞中完成剪切.
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