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目的:克隆烟曲霉角鲨烯环氧化酶基因并探讨其与特比萘芬抗烟曲霉活性的关系。方法:利用聚乙二醇-甘油法将0.5μg烟曲霉基因组DNA文库转化pyrG-烟曲霉AF293.1原生质体;在含有特比萘芬的最低培养基上筛选耐特比萘芬的pyrG+转化子,然后对介导特比萘芬耐药的烟曲霉基因进行序列分析并进行基因克隆;最后将克隆的基因重新转化到烟曲霉中以确认其与特比萘芬敏感性之间的关系。结果:从5×10^4个转化子中得到一个耐特比萘芬的pyrG+转化子,该转化子表现出特比萘芬特异性耐药性且与质粒高度相关;序列分析发