【摘 要】
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目的克隆表达ZS株弓形虫表膜抗原P22编码基因的巨噬细胞株.方法扩增P22编码基因ORF的全长561 bp片段,经PstI、XbaI双酶切后,定向克隆于质粒pBudCE 4.1,构建真核重组表达质粒p
【机 构】
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福建医科大学免疫学系,福建医科大学分子医学研究中心,武汉大学医学院生理学教研室
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目的克隆表达ZS株弓形虫表膜抗原P22编码基因的巨噬细胞株.方法扩增P22编码基因ORF的全长561 bp片段,经PstI、XbaI双酶切后,定向克隆于质粒pBudCE 4.1,构建真核重组表达质粒pBudCE 4.1/ P22,通过脂质体介导转染入小鼠巨噬细胞RAW264.7,以RT-PCR方法鉴定目的基因在巨噬细胞中的表达.结果成功获取pBudCE 4.1/ P22转染的巨噬细胞阳性克隆,并证实P22-mR NA在阳性克隆细胞中的表达,为P22蛋白对巨噬细胞的免疫调节功能作用的研究奠定基础.
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