【摘 要】
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用PCR技术从棉铃虫颗粒体病毒基因组中扩增得到增效蛋白基因DNA序列.PCR产物酶切后克隆至pBluescript质粒中,核苷酸序列测定表明,有8个核苷酸、5个氨基酸与Genbank发表的序列
【机 构】
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中国科学院微生物所分子病毒学开放实验室北京 100080
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用PCR技术从棉铃虫颗粒体病毒基因组中扩增得到增效蛋白基因DNA序列.PCR产物酶切后克隆至pBluescript质粒中,核苷酸序列测定表明,有8个核苷酸、5个氨基酸与Genbank发表的序列不同.继而构建了表达质粒pET-30a-En,诱导后经SDS-PAGE和Western blot检测,表明获得了增效蛋白基因在大肠杆菌BL21(DE3)中包涵体形式的特异表达.生物测定结果表明,初步纯化的重组增效蛋白具有明显的增效活性,可提高棉铃虫核多角体病毒对3龄幼虫致死率31.7%-34.1%.重组增效蛋白的获得对研究其增效机理及构建新型杀虫剂提供了条件.
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