【摘 要】
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目的:观察在人胃癌细胞SGC-7901中抑制粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)的表达对其凋亡的影响。方法:利用RNA干扰技术,将PGPU6/GFP/sh NC(sh NC)和PGPU6/GFP/FAK-299(s
【机 构】
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哈尔滨医科大学附属第一医院急诊外科,哈尔滨医科大学附属第一医院心血管内科导管室
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目的:观察在人胃癌细胞SGC-7901中抑制粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)的表达对其凋亡的影响。方法:利用RNA干扰技术,将PGPU6/GFP/sh NC(sh NC)和PGPU6/GFP/FAK-299(shRNA-299)瞬时转染至SGC-7901细胞中,Real-time PCR与Western blot检测干扰效果,MTT与流式细胞仪检测细胞增殖与凋亡情况,Western blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果:shRNA-299可以明显抑制FAK的表达水平,MTT显示与对照组相比,shRNA-299处理组SGC-7901细胞存活率明显下降到(31.5±2.3)%,并具有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测细胞凋亡显示,总凋亡率与对照组相比,shRNA-299处理组SGC-7901细胞凋亡率明显增加到(17.4±1.5)%,具有统计学意义(P<0.05)。Westen blot分析发现,shRNA-299处理组可以明显提高p53、Bax蛋白水平、激活的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,caspase)-3、caspase-9、PARP蛋白水平,而Bcl-2的蛋白水平下降。结论:shRNA-299可以明确的抑制SGC-7901细胞FAK的表达水平,并激活细胞凋亡相关的蛋白,导致细胞凋亡。
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