人乳腺癌相关抗原DF3转录调控序列的克隆及其调控表达

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目的克隆人乳腺癌相关抗原DF3转录调控序列(TRS),并检测其活性与细胞表面抗原DF3之间的关系.方法通过PCR技术克隆出人乳腺癌相关DF3抗原 5'端771bp的转录调控序列.分离纯化PCR产物并与pMD18-T载体相连接,酶切,测序验证.将DF3 TRS克隆到pGL3报告载体中.瞬时转染DF3阳性乳腺癌细胞株MCF-7,DF3阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231.荧光素酶定量分析检测启动子的活性.结果酶切,测序结果验证所获得的序列正确,在MDA-MB-231中只能检测到背景水平的荧光,而在MC
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