论文部分内容阅读
根据毕赤酵母密码子偏爱性，不改变毒素蛋白质一级结构，设计合成了昆虫神经毒素LqhIT2基因，并分别克隆至大肠杆菌融合表达载体pPET30-a（＋）和毕赤酵母分泌表达载体pPIC9K。在IPTG的诱导下，神经毒素在大肠杆菌中融合表达，表达产物经镍亲和层析纯化后，用于免疫BALB／c小鼠，制备了特异性较高的抗血清，抗体滴度超过1：128000。利用制备的抗血清，采用斑点杂交，筛选得到了较高水平分泌表达重组LqhIT2的酵母转化子，摇瓶条件下，毒素表达量约9mg／L。犬肠杆菌表达产物没有生物活性，酵母表达产物经