【摘 要】
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目的:探讨白花蛇舌草(Hedyotis diffusa)提取物对人肾癌780-0细胞在体外增殖及凋亡的影响.方法:选择体外培养的人肾癌780-0细胞,分别给予不同浓度的白花蛇舌草提取物(0、25、50、100、200、400、600和800μg/ml)处理细胞,采用CCK8法检测细胞的增殖情况,流式细胞技术检测细胞周期和细胞凋亡情况,荧光定量PCR法检测细胞周期蛋白的表达,Western blot检测凋亡相关蛋白及PI3K/Akt信号通路的表达水平,并应用PI3K/Akt激动剂观察细胞增殖及凋亡变化.结果
【机 构】
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秦皇岛市工人医院普外科,河北秦皇岛,066200;秦皇岛市工人医院骨外科,河北秦皇岛,066200;秦皇岛市工人医院检验科,河北秦皇岛,066200;锦州医科大学附属第一医院泌尿外科,辽宁锦州,121
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目的:探讨白花蛇舌草(Hedyotis diffusa)提取物对人肾癌780-0细胞在体外增殖及凋亡的影响.方法:选择体外培养的人肾癌780-0细胞,分别给予不同浓度的白花蛇舌草提取物(0、25、50、100、200、400、600和800μg/ml)处理细胞,采用CCK8法检测细胞的增殖情况,流式细胞技术检测细胞周期和细胞凋亡情况,荧光定量PCR法检测细胞周期蛋白的表达,Western blot检测凋亡相关蛋白及PI3K/Akt信号通路的表达水平,并应用PI3K/Akt激动剂观察细胞增殖及凋亡变化.结果:不同浓度的白花蛇舌草提取物均能抑制肾癌细胞的增殖,其抑制作用随着药物浓度的升高而增强.相较于对照组,白花蛇舌草干预后G0/G1期细胞百分比显著增加,S期细胞百分比显著减少(P＜0.05),细胞周期蛋白(Cyclin A、Cyclin B1、CDK2蛋白)的mRNA表达水平下降.白花蛇舌草处理后细胞凋亡率较对照组明显增加(P＜0.05),其凋亡蛋白Caspase-3表达增加、抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少.白花蛇舌草抑制PI3K/Akt信号通路的激活,而PI3K/Akt激动剂作用可减弱白花蛇舌草对细胞增殖的抑制及促凋亡作用.结论:白花蛇舌草能显著抑制肾癌780-0细胞的增殖及促进其凋亡,这种作用是通过调节PI3K/Akt信号通路所实现的.
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