【摘 要】
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目的 构建抗菌肽LL-37的表达载体pPIC9-LL-37,转化毕赤酵母GS115以获得表达LL-37的工程菌.方法 通过重叠区扩增法人工合成抗菌肽LL-37的基因,定向克隆到毕赤酵母表达载体pPIC
【机 构】
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南通市第三人民医院检验科,南通大学附属医院检验科,南通市红十字中心血站
【基金项目】
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南通市科学技术委员会资助项目（编号：S40032）.致谢：本论文的实验工作在南通大学微生物与免疫学实验室完成,在研究工作中得到实验室沈爱国教授等的热情指导和帮助,中国科学院上海生物化学研究所张倩老师给予了技术支持,在此表示深深的谢意!
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目的 构建抗菌肽LL-37的表达载体pPIC9-LL-37,转化毕赤酵母GS115以获得表达LL-37的工程菌.方法 通过重叠区扩增法人工合成抗菌肽LL-37的基因,定向克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9上,转化大肠杆菌DH5α,提取质粒,PCR鉴定及序列分析后转化毕赤酵母GS115.MM、MD平板筛选His^＋Mut^＋、His^＋Mut^-表型,PCR扩增鉴定基因的插入.结果 PCR鉴定及序列分析表明抗菌肽LL-37基因正确插入载体pPIC9,MM、MD平板筛选及PCR鉴定获得10个His^＋Mut^＋
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