【摘 要】
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目的:建立经济有效的方法,从大肠杆菌表达、纯化重组幽门螺杆菌尿素酶A、B亚单位.方法:含重组表达质粒pGEX-2T/ureA,pGEX-2T/ureB大肠杆菌分别在不同浓度IPTG、不同温度条件
【机 构】
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上海市疾病预防控制中心公共卫生与基因研究室
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目的:建立经济有效的方法,从大肠杆菌表达、纯化重组幽门螺杆菌尿素酶A、B亚单位.方法:含重组表达质粒pGEX-2T/ureA,pGEX-2T/ureB大肠杆菌分别在不同浓度IPTG、不同温度条件下作诱导培养,以SDS-PAGE分析表达产物,采用谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和层析分离纯化表达产物,以Western-blotting和ELISA对纯化产物作抗原性分析鉴定.结果:IPTG诱导浓度为0.1mmol/L;诱导温度为28℃,含重组质粒大肠杆菌表达可溶性融合蛋白GST-ureA、GST-ureB
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