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将中国鸡痘病毒鹌鹑化弱毒株(282E4)蚀斑纯化,在SPF鸡胚成纤维细胞上增殖后,经超声波裂解,蔗糖梯度离心得到纯化病毒,以蛋白酶K消化,酚:氯仿、氯仿和水饱和乙醚抽提,乙醇沉淀,得到FPV基因组DNA,后用EcoRI消化,随机克隆到pUC18质粒中。限制性内切酶片段电泳分析结果表明,克隆到10个不同大小的片段,根据酶切图谱分析,选取克隆或亚克隆后的单一酶切位点,插入标记基因筛选出3个复制非必需片