【摘 要】
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目的:建立基于细胞水平评价重组血管内皮生长因子受体-抗体Fc(重组人IgG VEGFR:Fc)融合蛋白生物学活性的方法.方法:取不超过10代且处于对数生长期的HUVEC细胞,以含5％FBS的ECM
【机 构】
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复旦大学生命科学学院 200433;
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目的:建立基于细胞水平评价重组血管内皮生长因子受体-抗体Fc(重组人IgG VEGFR:Fc)融合蛋白生物学活性的方法.方法:取不超过10代且处于对数生长期的HUVEC细胞,以含5％FBS的ECM培养基重悬细胞,调整细胞密度至3×104个/mL,每孔100μL接种于96孔细胞培养板中.通过样品在10μg/mL～0.007μg/mL浓度范围内抑制15ng/mL VEGF介导细胞增殖活性的不同,得到抑制一半VEGF所需要的样品量.结果:样品浓度在5～15μg/mL的范围内线性关系良好、准确度和重复性均较高.结论:成功建立重组人IgG VEGFR:Fc融合蛋白中和VEGF介导HU-VEC细胞增殖的细胞模型,符合方法学验证基本要求,为重组人IgG VEGFR:Fc融合蛋白的生物活性检测提供了切实可行的方法.
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