研究Neuroligin1基因在Wistar大鼠胚胎的肠神经系统(ENS)中的表达情况,探讨Neuroligin1基因的表达与ENS和ENS疾病之间的关系。
方法取胚胎第16(E16)、18(E18)、20(E20)天和出生第一天(B1)的胚鼠肠管标本各30只,通过双重免疫荧光染色、Western blot、实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)等实验方法,研究Neuroligin1基因在Wistar大鼠胚胎ENS各个发育时期中的表达情况。
结果在Wistar大鼠E16、E18、E20和B1四个ENS发育时期中:双重免疫荧光染色显示Neuroligin1基因阳性面积的平均光密度值分别为E16(0.046±0.031),E18(0.146±0.033),E20(0.233±0.034),B1(0.345±0.344),且四组之间的差别有统计学意义(F=441.614, P<0.05);Western blot显示Neuroligin1基因的平均蛋白表达量分别为E16(0.053±0.025)、E18(0.146±0.024)、E20(0.249±0.034)、B1(0.533±0.049),且四组之间的差异有统计学意义(F=1070.296,P<0.05);qRT-PCR显示Neuroligin1基因的mRNA相对平均浓度分别为E16(2.543±1.294)、E18(4.637±1.830)、E20(6.814±1.552)、B1(8.345±1.364),且四组之间的差异有统计学意义(F=81.440,P<0.05),同时qRT-PCR试验中Neuroligin1基因的mRNA表达趋势与Western blot中Neuroligin1基因的蛋白表达趋势一致。
结论在E16到B1这段时期内,随着Wistar大鼠ENS的发育,Neuroligin1在ENS的表达呈递增趋势;Neuroligin1在ENS的异常表达发生越早,相关疾病可能就越严重;Neuroligin1基因相关的ENS疾病可能是先天发育异常。