【摘 要】
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目的:从短乳杆菌中克隆、重组表达鸟氨酸氨甲酰基转移酶,研究其酶学性质。方法:基于短乳杆菌的基因序列分析,以其为模板克隆获得鸟氨酸氨甲酰基转移酶基因,以大肠杆菌为宿主
【机 构】
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浙江科技学院,浙江省农产品化学与生物加工技术重点实验室,浙江大学
【基金项目】
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浙江省自然科学基金项目(LQ18C00003),浙江省公益技术研究计划项目(LGN19C200004)
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目的:从短乳杆菌中克隆、重组表达鸟氨酸氨甲酰基转移酶,研究其酶学性质。方法:基于短乳杆菌的基因序列分析,以其为模板克隆获得鸟氨酸氨甲酰基转移酶基因,以大肠杆菌为宿主进行重组表达,经Ni-NTA亲和层析柱纯化获得重组蛋白。以精氨酸为底物,研究鸟氨酸氨甲酰基转移酶的酶学性质。结果:重组鸟氨酸氨甲酰基转移酶最适温度为55℃,4℃下热稳定性优异,37℃下放置3 h仍保持50%以上的生物活性,然而,在65℃放置40 min已检测不到酶活性;该酶的最适pH值为6.5,当pH值为碱性时,酶活力下降明显;NaCl质量分数
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