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目的
观察血晶素(Hemin)在大鼠肝纤维化进展过程中的治疗效果并探讨其相关作用机制。
方法将60只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、4周模型组、6周模型组、血红素加氧酶-1(HO-1)抑制剂锌原卟啉-IX(ZnPP-IX)干预组、Hemin干预组,在复合因素构建肝纤维化模型过程中,干预组自第4周起开始给予隔日腹腔注射ZnPP-IX或Hemin干预2周。采用实时定量聚合酶链反应检测肝组织HO-1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及核转录因子-κB(NF-κB)的mRNA表达;采用免疫组织化学技术检测HO-1及α-SMA定位表达;酶联免疫吸附法测定检测血清透明质酸、Ⅲ型胶原前肽及肝组织转化生长因子β(TGFβ)、白细胞介素6(IL-6)的表达;碱水解法检测肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量。应用单因素方差分析(One-way ANOVA)进行各组样本均数的比较,两组间差异比较采用两独立样本的t检验,P < 0.05为差异有统计学意义。
结果Hemin的干预同模型组及ZnPP-IX处理组相比可显著促进肝组织中HO-1的mRNA表达(P < 0.01)及蛋白分布,而α-SMA的mRNA表达(P < 0.05)及在汇管区、纤维间隔与肝窦周围分布明显减少,Hyp含量及血清中透明质酸、Ⅲ型胶原前肽水平均显著下降(P < 0.05);同时Hemin干预组NF-κB p65的mRNA表达及其下游TGFβ、IL-6的产生也受到抑制(P < 0.05)。
结论血晶素可以显著抑制大鼠肝纤维化进展,该作用同其上调HO-1表达,进而抑制NF-κB p65的活性及下游炎性因子的释放密切相关。