【摘 要】
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目的探讨内质网应激(ERS)介导的晚期氧化蛋白产物(AOPPs)诱导肾小管上皮细胞(HK-2)的自噬抑制及其信号通路。方法 (1)AOPPs刺激HK-2细胞,检测信号通路腺苷酸活化蛋白激酶/乳
【机 构】
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南方医科大学南海医院血液净化中心,南方医科大学珠江医院肾内科
【基金项目】
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2017佛山市卫生和计划生育局科研课题立项项目(20170214)
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目的探讨内质网应激(ERS)介导的晚期氧化蛋白产物(AOPPs)诱导肾小管上皮细胞(HK-2)的自噬抑制及其信号通路。方法 (1)AOPPs刺激HK-2细胞,检测信号通路腺苷酸活化蛋白激酶/乳动物雷帕霉素靶蛋白(AMPK/mTOR)的表达;(2)AMPK抑制剂Compoun C和激活剂AICAR分别预处理细胞,并予AOPPs刺激,检测自噬标志物LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、P62及AMPK/mTOR蛋白的表达;(3)ERS激活剂Thapsigargin与抑制剂Salubrinal分别预处理细胞,并予AOPPs刺激,检测ERS标志蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、自噬及AMPK/mTOR蛋白的表达。结果 AOPPs可抑制AMPK的磷酸化和诱导mTOR的磷酸化(P<0.05)。Compoun C使LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1表达下降,p62表达上升,同时抑制AMPK的磷酸化和诱导mTOR的磷酸化(P<0.05),而AICAR表现出相反的效果。Thapsigargin能抑制AMPK的磷酸化和诱导mTOR的磷酸化,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1表达下降,p62表达上升,而Salubrinal表现出相反的效果。结论ERS可能通过激活AMPK/mTOR信号通路介导AOPPs诱导的自噬抑制的发生。
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