【摘 要】
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目的探讨巨噬细胞对卵巢癌细胞血管细胞黏附分子1（VCAM1）表达的影响及其机制。方法利用佛波酯、脂多糖将单核细胞THP-1激活成为巨噬细胞。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测巨噬细胞上清中细胞因子水平，实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测巨噬细胞上清对人类卵巢癌细胞HEY、IGROV1的VCAM1 mRNA水平的影响，蛋白质印迹法检测巨噬细胞上清对稳定表达VCAM1的细胞株HEY-VCA
【机 构】
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710032 西安，空军军医大学基础医学院病理学教研室暨西京医院病理科,710032 西安，空军军医大学基础医学院病理学教研室暨西京医院病理科,710032 西安，空军军医大学基础医学院病理学教研室暨
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目的探讨巨噬细胞对卵巢癌细胞血管细胞黏附分子1（VCAM1）表达的影响及其机制。
方法利用佛波酯、脂多糖将单核细胞THP-1激活成为巨噬细胞。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测巨噬细胞上清中细胞因子水平，实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测巨噬细胞上清对人类卵巢癌细胞HEY、IGROV1的VCAM1 mRNA水平的影响，蛋白质印迹法检测巨噬细胞上清对稳定表达VCAM1的细胞株HEY-VCAM1、IGROV1-VCAM1中VCAM1蛋白表达的影响；利用双荧光素酶报告基因检测巨噬细胞上清及细胞因子对人类胚肾细胞HEK293T VCAM1基因不同截短体的启动子转录活性的影响。
结果ELISA检测结果发现，与THP-1细胞上清相比，巨噬细胞释放的肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）及IL-12均升高（均P<0.05），IL-10下降（t=3.841，P=0.019）。巨噬细胞上清及1 ng/ml TNF-α能够上调HEY和IGROV1细胞VCAM1 mRNA水平，巨噬细胞上清能够促进HEY-VCAM1、IGROV1-VCAM1细胞VCAM1蛋白表达。与空载体（pGV354）对照组[（8.6±0.2）×10-3相对荧光单位（RLU）]相比，巨噬细胞上清上调HEK293T细胞VCAM1基因含有AP1的转录结合位点的-1 641 bp至+12 bp启动子报告基因荧光素酶活性[（109.4±3.4）×10-3 RLU；t=29.42，P<0.001]；与未经细胞因子处理的阴性对照组[（21.0±0.5）×10-3 RLU]相比，100 ng/ml TNF-α促进HEK293T细胞VCAM1的-1 641 bp至+12 bp启动子转录活性[（23.4±0.4）×10-3 RLU；t=4.134，P=0.001]，150 ng/ml IL-6未影响此启动子转录活性[（21.4±1.0）×10-3 RLU；t=0.328，P=0.708]，5 ng/ml IL-12抑制此启动子转录活性[（14.3±1.0）×10-3 RLU；t=6.390，P<0.001]。
结论巨噬细胞促进卵巢癌细胞VCAM1的表达。其机制可能是巨噬细胞分泌的TNF-α等炎症因子影响含有AP1转录结合位点的VCAM1启动子区域，促进卵巢癌细胞VCAM1 mRNA表达。
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