【摘 要】
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目的观察二陈汤合桃红四物汤含药血清对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导内皮细胞损伤的保护作用并探讨其可能的机制。方法培养EA.hy926细胞,随机分为对照组、ox-LDL组、干预
【机 构】
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广州中医药大学第一临床医学院,辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室,广州中医药大学第一附属医院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(81774022、81300229),国家重点基础研究发展计划项目(973计划)(2013CB531704)
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目的观察二陈汤合桃红四物汤含药血清对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导内皮细胞损伤的保护作用并探讨其可能的机制。方法培养EA.hy926细胞,随机分为对照组、ox-LDL组、干预组、抑制剂组。流式细胞仪检测各组细胞凋亡水平,比色法检测细胞内丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性,ELISA检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平,Western blot检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化AKT(p-AKT)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达水平。结果与对照组比较,ox-LDL组细胞上清液中TNF-α和IL-6水平显著升高(P<0.01),细胞内MDA含量显著升高(P<0.01),SOD活性明显降低(P<0.05),上清液中NO水平显著降低(P<0.01),活性氧(ROS)含量和细胞凋亡率明显升高,PI3K、eNOS蛋白表达水平和AKT蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.01)。与ox-LDL组比较,干预组细胞上清液中TNF-α和IL-6水平显著降低(P<0.01),细胞内MDA含量显著降低(P<0.01),SOD活性明显升高(P<0.05),上清液中NO水平显著升高(P<0.01),ROS含量和细胞凋亡率明显降低,PI3K、eNOS蛋白表达水平和AKT蛋白磷酸化水平显著升高(P <0.01)。与干预组比较,抑制剂组细胞上清液中TNF-α和IL-6水平显著升高(P<0.01),细胞内MDA含量显著升高(P<0.01)、SOD活性明显降低(P<0.05),上清液中NO水平明显降低(P<0.05),细胞内ROS含量升高,PI3K、eNOS蛋白表达水平和AKT蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.01)。结论二陈汤合桃红四物汤含药血清能有效保护ox-LDL诱导的内皮细胞损伤,其机制可能与激活PI3K/AKT/eNOS信号通路有关。
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