【摘 要】
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用含有载脂蛋白EcDNA的PET32a原核表达载体转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,使之高效表达载脂蛋白E thioredoxin融合蛋白。利用融合蛋白上的一段组氨酸序列 ,用镍离子亲合层析柱进行
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用含有载脂蛋白EcDNA的PET32a原核表达载体转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,使之高效表达载脂蛋白E thioredoxin融合蛋白。利用融合蛋白上的一段组氨酸序列 ,用镍离子亲合层析柱进行分离纯化。由于在载脂蛋白E和thioredoxin之间存在凝血酶的识别位点 ,用凝血酶消化后 ,经SephacrylS 30 0凝胶过滤得到人重组载脂蛋白E。用此方法可以从 1L大肠杆菌培养液中纯化 2 0～ 30mg高纯度的各种载脂蛋白E异构体和非自然存在的突变体 ,方法简便 ,产量高 ,纯度达 95 %以上。
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