【摘 要】
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目的探讨不同浓度和时间条件下,打孔试剂Triton X-100对胃癌细胞系BGC-823中MAC30和F-actin表达和定位精度的影响。方法应用0.1%、0.2%或0.5%含量的打孔试剂Triton X-100,处
【机 构】
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中国医科大学基础医学院病理生理学教研室,沈阳市妇婴医院妇产科,
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目的探讨不同浓度和时间条件下,打孔试剂Triton X-100对胃癌细胞系BGC-823中MAC30和F-actin表达和定位精度的影响。方法应用0.1%、0.2%或0.5%含量的打孔试剂Triton X-100,处理BGC-823细胞5、10或15min,然后利用MAC30和F-actin抗体进行免疫荧光染色。结果当应用0.1%Triton X-100与固定的胃癌细胞系BGC-823作用5min,MAC30蛋白在BGC-823细胞质中高表达,F-actin染色清晰。随着打孔试剂含量从0.1%提高到0.5%,或作用时间从5min延长到15 min,MAC30在细胞质和细胞核中表达也随之上调,尤在细胞质中高表达,而F-actin染色则开始变得模糊,直至无法分辨肌丝和伪足。结论应用细胞免疫荧光染色揭示某蛋白与胃癌发生发展相关性研究中,应考虑不同打孔时间和含量所产生的染色结果差异,注重实验条件的选择与优化。
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