【摘 要】
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目的 探讨STAT3 RNA干扰(RNAi)对脑胶质瘤U251细胞活性氧含量及DNA损伤的影响.方法 利用构建好的STAT3 RNAi载体(pSilencer2.1-STAT3,STAT3组)和pSileneer2.1-GFP(RNAi对照组
【机 构】
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中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所,军事医学科学院放射与辐射医学研究所
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目的 探讨STAT3 RNA干扰(RNAi)对脑胶质瘤U251细胞活性氧含量及DNA损伤的影响.方法 利用构建好的STAT3 RNAi载体(pSilencer2.1-STAT3,STAT3组)和pSileneer2.1-GFP(RNAi对照组)分别转染U251细胞,分别检测24、48和72 h后细胞内活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)水平;同时利用单细胞凝胶电泳方法,检测6、12和24 h后细胞内DNA损伤;利用碘化丙啶(PI)单染流式检测12、24、36和48 h后细胞周期分布情况.结果 U251细胞转染pSileneer2.1-STAT3 24 h后,细胞内ROS水平是对照的8.91倍(F=89.296,P＜0.05),48 h后回复到正常水平;24、48和72 h siSTAT3组和siGFP组之间MDA水平无显著变化;同时,与出现明显拖尾现象的8 Gy照射U251细胞阳性对照组相比,转染pSilencer2.1-STAT3 6 h后部分细胞出现拖尾现象,12 h后拖尾变得较少,24 h后完全消失.与对照组相比,siSTAT3转染组12 h后s期的滞后率是17.22%,G2/M的滞后率是6.4%;24h后G0/G1的滞后率是18.44%;36 h后,s期的滞后率是17.99%.结论 对U251细胞STAT3 RNAi后,细胞内氧化还原状态发生改变,同时伴有DNA的损伤与修复.
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