【摘 要】
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目的 应用RNA干扰方法抑制胚胎来源神经前体细胞Oct-4基因表达,以观察Oct-4基因在胚胎来源神经前体细胞向神经元分化中的作用.方法 采用“五步法”诱导小鼠胚胎干细胞向神经
【机 构】
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解放军101医院脑科医院,大连医科大学第一附属医院神经外科,首都医科大学宣武医院细胞治疗室,首都医科大学宣武医院神经外科,中国医学科学院北京协和医院神经外科
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目的 应用RNA干扰方法抑制胚胎来源神经前体细胞Oct-4基因表达,以观察Oct-4基因在胚胎来源神经前体细胞向神经元分化中的作用.方法 采用“五步法”诱导小鼠胚胎干细胞向神经元分化,进入扩增期后给予Oct-4干扰RNA,采用Real-time PCR方法检测干扰后细胞Oct-4表达情况,进行分化计数,免疫组化鉴定分化后的细胞,计数分化后的新生神经元比例.结果 Oct-4干扰RNA使神经前体细胞Oct-4表达下降约40％,正常未干扰胚胎干细胞分化的神经元为(75.5±5.2)％,GFP组为(73.8±4.7)％,Oct4干扰RNA组为(33.8±2.9)％,与正常组和GFP组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 采用RNA干扰方法可以有效降低神经前体细胞Oct-4的表达,使分化后新生神经元生成减少,证实了Oct-4基因在胚胎来源神经前体细胞向神经元分化中发挥着重要作用.
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