cGAS/STING信号通路参与猪圆环病毒2型诱导猪肺泡巨噬细胞产生Ⅰ型干扰素

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yeyayuqiya
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为研究猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染的猪肺泡巨噬细胞(Porcine alveolar macrophages,PAMs)分泌Ⅰ型干扰素信号通路,以PCV2病毒感染PAMs为研究对象,采用酶联免疫吸附测定(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、实时荧光定量PCR和Western blotting,分析PCV2感染对PAMsⅠ型干扰素的诱导、cGAS/STING信号通路相关基因mRNA和蛋白表达的影响,并应用靶向cGAS和STING特异性siRNA、抑制剂BX795和BAY 11-7082,解析cGAS、STING、TBK1和NF-κB/P65在PAMs生成Ⅰ型干扰素中的作用.结果 显示,PAMs感染PCV2病毒48 h后Ⅰ型干扰素的表达量显著升高(P<0.05),cGAS mRNA的表达量在感染48 h和72 h后显著升高(P< 0.01),STING mRNA表达量在PCV2感染72 h后显著上升(P<0.01),TBK1 mRNA、IRF3 mRNA感染48 h后显著升高(P<0.01).PCV2能够显著升高PAMs胞浆STING、TBK1和IRF3蛋白含量,降低胞浆NF-κB/p65的含量,促进NF-KB/p65和IRF3入核.敲低PAMs中cGAS或STING表达水平后,PCV2感染PAMs 48 h后,I型干扰素的表达水平显著下降(P< 0.01);BAX795抑制TBK1后,PCV2感染PAMs 48hi型干扰素的表达水平显著下降(P<0.01),BAY 11-7082抑制NF-KB/P65表达后,PCV2感染PAMs 48 h I型干扰素的表达量与PCV2组相比无显著性差异(P>0.05).结果 表明,PAMs感染PCV2后通过cGAS/STING/TBK l/IRF3信号通路诱导I型干扰素分泌.
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