【摘 要】
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目的:克隆狂犬病毒ERA株核蛋白基因并对核蛋白主要抗原表位进行分析。方法:根据GenBank中已发表的RVN基因序列,设计合成了1对特异性引物,对RVERA株N基因进行了RT-PCR扩增。将
【机 构】
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呼伦贝尔学院生命科学与化学学院; 军事医学科学院军事兽医研究所;
【基金项目】
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科技部科技攻关计划课题(狂犬病、尼帕、西尼罗)防制技术平台(2004BA519A48)
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目的:克隆狂犬病毒ERA株核蛋白基因并对核蛋白主要抗原表位进行分析。方法:根据GenBank中已发表的RVN基因序列,设计合成了1对特异性引物,对RVERA株N基因进行了RT-PCR扩增。将PCR产物纯化后与pMD18-T连接得到重组质粒pMD-N,并进行核苷酸序列测定。结果:该基因全长1353bp,编码450个氨基酸。RVERA株与Gen-Bank中RV不同固定毒株和分离毒株N基因相比,核苷酸的同源性为98.0%～99.6%,推导的氨基酸序列的同源性为98.3%～99.6%。核蛋白主要抗原表位分析表明,ERA株与其他固定毒株和分离毒株相比,仅在BC抗原表位(369～383位氨基酸)和Th抗原表位(394～408位氨基酸)处有1～3个氨基酸的不同,其他表位无差异。但与Lagosbat、Mokola和Duvenhage毒株相比,抗原位点氨基酸组成差异明显。结论:RVERA株N基因可用于基因工程疫苗研制和核酸检测的靶基因;核蛋白可作为抗原用于狂犬病的检测。
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