【摘 要】
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目的 探讨重楼皂苷Ⅰ对人骨肉瘤MG63细胞增殖、凋亡及DNA损伤的影响.方法 将MG63细胞分为PBS对照组、0.625μmol/L重楼皂苷Ⅰ组、1.25μmol/L重楼皂苷Ⅰ组,各组给予相应干预72 h后,采用Cou-ntstar细胞计数仪检测细胞存活率;将MG63细胞分为PBS对照组、0.625μmol/L重楼皂苷Ⅰ组,划痕实验检测各组培养0 h、24 h、48 h、72 h细胞迁移能力;将MG63细胞分为PBS对照组、0.625μmol/L重楼皂苷Ⅰ组、1.25μmol/L重楼皂苷Ⅰ组,流式细胞术检
【机 构】
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广东省中医院,广东 广州 510120;上海中医药大学博士后科研流动站,上海201203;广东省中医院博士后科研工作站,广东 广州510120;上海中医药大学附属龙华医院,上海201203;广东省中医
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目的 探讨重楼皂苷Ⅰ对人骨肉瘤MG63细胞增殖、凋亡及DNA损伤的影响.方法 将MG63细胞分为PBS对照组、0.625μmol/L重楼皂苷Ⅰ组、1.25μmol/L重楼皂苷Ⅰ组,各组给予相应干预72 h后,采用Cou-ntstar细胞计数仪检测细胞存活率;将MG63细胞分为PBS对照组、0.625μmol/L重楼皂苷Ⅰ组,划痕实验检测各组培养0 h、24 h、48 h、72 h细胞迁移能力;将MG63细胞分为PBS对照组、0.625μmol/L重楼皂苷Ⅰ组、1.25μmol/L重楼皂苷Ⅰ组,流式细胞术检测干预24 h后各组细胞凋亡率;将MG63细胞分为PBS对照组、0.625μmol/L重楼皂苷Ⅰ组、1.25μmol/L重楼皂苷Ⅰ组,TUNEL法和彗星实验分别检测细胞DNA损伤情况;Western blot法检测1.25μmol/L重楼皂苷Ⅰ处理0 h、0.5 h、1.0 h、1.5 h、3 h、6 h后MG63细胞中Bax、Bcl-2、Cleaved PARP蛋白表达情况.结果 0.625μmol/L重楼皂苷Ⅰ组和1.25μmol/L重楼皂苷Ⅰ组细胞存活率均明显低于PBS对照组(P均<0.05),且1.25μmol/L重楼皂苷Ⅰ组明显低于0.625μmol/L重楼皂苷Ⅰ组(P<0.05).培养24 h、48 h、72 h时,0.625μmol/L重楼皂苷Ⅰ组的划痕宽度均大于PBS对照组(P均<0.05).0.625μmol/L重楼皂苷Ⅰ组和1.25μmol/L重楼皂苷Ⅰ组细胞凋亡率、TUNEL/DPAI荧光值、细胞DNA损伤率均明显高于PBS对照组(P均<0.05),且1.25μmol/L重楼皂苷Ⅰ组均明显高于0.625μmol/L重楼皂苷Ⅰ组(P均<0.05).1.25μmol/L重楼皂苷Ⅰ培养后0 h、0.5 h、1.0 h、1.5 h、3 h、6 h,Bax、Cleaved PARP蛋白表达随时间延长而逐渐增高,Bcl-2蛋白表达逐渐降低.结论 重楼皂苷Ⅰ能够通过诱导DNA损伤抑制骨肉瘤MG63细胞增殖、迁移,促进细胞凋亡,发挥抑制骨肉瘤的作用.
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