【摘 要】
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用改良CTAB法提取巴西橡胶树幼嫩叶片总DNA,通过限制性内切酶Sau3A I不完全酶切,回收并纯化后得到15～23kb的DNA片段.以来源于λ噬菌体的EMBL3为载体DNA,用T4DNA连接酶将载体与
【机 构】
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湖南农业大学理学院,热带生物技术国家重点实验室,湖南农业大学理学院
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用改良CTAB法提取巴西橡胶树幼嫩叶片总DNA,通过限制性内切酶Sau3A I不完全酶切,回收并纯化后得到15～23kb的DNA片段.以来源于λ噬菌体的EMBL3为载体DNA,用T4DNA连接酶将载体与DNA片段连接成为重组DNA.经体外包装形成完整的噬菌体颗粒,转染受体菌E.coli LE392,在LB平板培养基上获得重组子的效率为1.1×106个/μg DNA,达到构建文库的要求.随机挑取一定数量的克隆子,酶切分析结果发现有88%的克隆子携带外源DNA.
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