【摘 要】
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目的建立大鼠颏舌肌成肌细胞体外培养方法,观察成肌细胞生物学特性。方法取新生3 d内SD大鼠,机械法分离颏舌肌组织,应用胶原酶、胰蛋白酶两步消化法获得成肌细胞,差速贴壁法
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(2013 81301669);浙江省医药卫生科技项目(2013KYA118)
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目的建立大鼠颏舌肌成肌细胞体外培养方法,观察成肌细胞生物学特性。方法取新生3 d内SD大鼠,机械法分离颏舌肌组织,应用胶原酶、胰蛋白酶两步消化法获得成肌细胞,差速贴壁法纯化细胞,细胞计数法绘制生长曲线,α-sarcomeric actin免疫细胞化学鉴定细胞来源。结果成功获得大鼠颏舌肌成肌细胞,超过90%的细胞α-sarcomeric actin染色阳性,证明其为骨骼肌细胞来源。体外培养的成肌细胞呈现良好的增殖和分化能力,在生长培养基中细胞的倍增时间为4~5d,高密度时细胞相互接触融合形成肌管。结论消化法与差速贴壁法结合能够获得足量、纯净的颏舌肌成肌细胞,所得细胞增殖力强,能表达骨骼肌特异性蛋白。
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