【摘 要】
：
目的提高脂质体介导的细胞转染效率。方法在传统的脂质体生化转染过程中,介入了简单的物理转染技术,并应用有限稀释克隆技术和共聚焦荧光显微镜检测技术,对转染细胞进行了早
【机 构】
：
吉林大学基础医学院免疫教研室,吉林大学基础医学院分子生物学教研室
【基金项目】
：
国家“973”资助项目(2002AA214141)
论文部分内容阅读
目的提高脂质体介导的细胞转染效率。方法在传统的脂质体生化转染过程中,介入了简单的物理转染技术,并应用有限稀释克隆技术和共聚焦荧光显微镜检测技术,对转染细胞进行了早期克隆筛选,用流式细胞术对转染细胞表达GFP的阳性率进行检测。结果流式细胞术检测显示,通过改良法获得转染pcDNA3-GFP-PSA质粒的B16、RM1和EL4细胞,表达报告蛋白GFP的阳性百分率(26%、24%和40%)高于传统法转染的细胞(16%、16%和18%)。改良法转染的B16、RM1和EL4经过克隆筛选、液氮冻存、水浴复苏和体外连续培养2周后,外源基因报告蛋白GFP表达的阳性百分率分别为77%、69%和83%。在转染流程上,通过改良法获得单克隆转染细胞株的时间明显缩短。结论改良的脂质体转染方法结合细胞克隆技术,能在最短时间内获得高表达外源基因的转染细胞株。
其他文献
在新能源发展的进程中,对新能源界定的不统一将阻碍新能源的健康发展。在列举新能源不同界定及常见认识的基础上,探讨了新能源本身范畴的内涵问题,并分析了其与相关概念的相
地球物理方法在环境污染监测中的应用主要是基于污染物及其周围介质物理和化学性质的差异,通过对物理定律的研究和分析,使用专门的设备和仪器来测量污染物理场的分布。然后结
IL-33(inteleukin 33,IL-33)作为IL-1家族的一员,与其特异性受体ST2结合,参与固有免疫和获得性免疫。IL-33主要通过促进Th2细胞免疫反应,在自身免疫疾病、变态反应性疾病、心
随着世界各国开始了电力改革,解除管制的概念被提出来,将发电、输电、配电以及售电等按照商业的角度划分开来,也推动了电力工业的发展。随着经济发展,电力金融逐渐衍生出期货、期权的产品,让电力行业的参与者得到了规避风险的工具。在国内,电力行业也需要进行系统的改革,尤其是市场机制。中国电力消耗十分巨大,中国经济也受到电力行业的巨大影响。根据竞价原则,发电商在展开预测条件下,对发电和负荷进行报价,展开市场化的
职业学校的学生是升不上普通高中的学生，是初中阶段的后进生．是教师眼中的差生。父母心中“不争气”的孩子。由于初中迫于升学的压力，这些学生被边缘化了。他们自信心受挫，认为自
案例:维多利亚的秘密商店品牌管理有限公司诉上海麦司投资管理有限公司侵犯商标专用权和不正当竞争案上海麦司投资管理有限公司(以下简称“麦司公司”)的两类行为:第一,未经
研究背景:乳腺癌是女性最常见的肿瘤,居世界女性恶性肿瘤发病率的第一位,严重影响着女性的健康。三阴性乳腺癌(triple negative breast carcinoma,TNBC)是指雌激素受体(estro
目的 探讨儿童良性癫痫伴中央 颞部局灶放电 (benignepilepsyofchildhoodwithcentral temporalspikes ,BECCT)患者的临床和脑电图 (EEG)演变过程的特点 ,分析与病程长短有
牧区社区建设,是释放牧区社区发展潜力的有效途径,能够更好地解决牧区经济、政治、文化、社会、生态协调发展问题,协调推进畜牧业的生存与发展,提高牧民生活水平,保护和传承牧区传统文化。研究牧区社区建设,也是落实习近平总书记考察内蒙古重要讲话精神,保障国家的生态、国防安全,促进民族关系和谐,确保边疆民族地区的长治久安的客观需要。目前,国内外在牧区社区建设途径选择上不尽相同,受限于现有国家政策和基层管理者认
中华蜜蜂(Apis cerana cerana)是我国特有的优良蜜蜂品种,在促进经济发展和维持生态平衡方面发挥着重要作用。由于对外界刺激较为敏感,中华蜜蜂受环境胁迫影响较大,这制约了中华蜜蜂种群的生存与发展,研究中华蜜蜂的抗逆性能与防御机制对于中华蜜蜂种群的持续健康发展具有重要意义。泛素结合酶(Ubiquitin-conjugating enzyme E2,UBE2)在氧化应激响应、DNA损伤修复