【摘 要】
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为建立灵敏、快速的犬细小病毒(CPV)检测方法,本研究针对CPVVP2基因保守序列设计一对能扩增574bp片段的特异性引物,对纳米PCR的退火温度、引物浓度等反应条件进行了优化,并对
【机 构】
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中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,农业部兽用药物与诊断技术北京科学观测实验站,北京市畜牧总站,中国农业科学院
【基金项目】
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中国农业科学院创新工程项目(ASTIP-IAS15);中国农业科学院基本科研业务费(2018-YWF-YTS-16);“十三五”国家重点研发计划(2016YFD0501003;2017YFD0501603)
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为建立灵敏、快速的犬细小病毒(CPV)检测方法,本研究针对CPVVP2基因保守序列设计一对能扩增574bp片段的特异性引物,对纳米PCR的退火温度、引物浓度等反应条件进行了优化,并对其特异性和灵敏度进行了评估。结果表明,所建立的纳米PCR特异性和灵敏性良好,最低核酸检出量为2拷贝·μL^-1,其敏感性比常规PCR高1000倍。分别采用纳米PCR和常规PCR,对广西、北京、吉林送检的75份疑似CPV的临床样品进行检测,CPV阳性率分别为89.3%(67/75)和70.7%(53/75),表明该方法
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