【摘 要】
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将人工合成的口蹄疫病毒VP1-3上的抗原表位基因和猪γ-干扰素基因串联入原核表达载体pGEx-KG中,经酶切鉴定及测序表明重组载体中二者以接头融合的形式构建成重组表达质粒.将
【机 构】
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华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室
【基金项目】
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国家863计划基金（2002AA245071）及湖北省科技攻关（2004AA202801）资助项目
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将人工合成的口蹄疫病毒VP1-3上的抗原表位基因和猪γ-干扰素基因串联入原核表达载体pGEx-KG中,经酶切鉴定及测序表明重组载体中二者以接头融合的形式构建成重组表达质粒.将该质粒转化BL21后经IPTG诱导,实现了重组融合蛋白的高效表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析,重组蛋白分子量约为66 Ku,与预期大小相符.薄层扫描分析显示表达的重组蛋白占菌体总蛋白的37.4%,且主要以包涵体的形式存在.包涵体以SKL变性后,经PEG4000、氧化型谷胱苷肽和还原型谷胱苷肽复性.粗提产物
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