胰岛素样生长因子结合蛋白7基因对胃癌细胞周期和体内外增殖的影响

来源 :中华消化杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Lotus35000
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的

利用过表达和干扰技术,观察胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)对胃癌细胞增殖和细胞周期,以及对细胞周期素D1和细胞周期素依赖性激酶4(CDK4)表达的影响,构建裸鼠移植瘤模型,观察IGFBP7对胃癌瘤体生长的影响。

方法

采用小干扰核糖核酸(siRNA)干扰胃癌细胞株MKN-28中IGFBP7表达,并建立空白对照组和阴性对照组。采用pcDNA3.1-IGFBP7质粒转染SGC-7901细胞,使之过表达IGFBP7并建立相应的空白对照组和空载体组。培养48 h,采用MTT实验和克隆形成实验检测IGFBP7干扰和过表达后胃癌细胞体外增殖情况;流式细胞术检测IGFBP7对细胞周期的影响,蛋白质印迹法检测各组细胞中细胞周期素D1和CDK4。分别用过表达IGFBP7的SGC-7901稳定转染细胞及未转染SGC7901细胞建立裸鼠移植瘤模型,观察20 d内IGFBP7对胃癌移植瘤体生长的影响。采用单因素方差分析、LSD法和独立样本t检验比较组间差异。

结果

MTT实验和克隆形成实验发现,与空白和阴性对照组比较,干扰IGFBP7的表达能促进MKN-28细胞的增殖(3.013±0.322、2.903±0.210比4.502±0.356,F=18.31,P=0.002 8),细胞克隆形成增多,G1期细胞减少[(57.29±1.30)%、(52.27±0.90)%比(36.81±0.83)%,F=321.57,P<0.01];与空白对照组和空载体组比较,增加IGFBP7的表达能抑制SGC-7901细胞的增殖(3.142±0.320、3.214±0.226比1.813±0.165,F=22.35,P=0.001 7),细胞克隆形成减少,使细胞周期处于G1期细胞增多[(49.34±1.20)%、(47.42±0.71)%比(57.73±0.73)%,F=109.230,P <0.01)]。蛋白质印迹法发现干扰IGFBP7能够增加细胞周期素D1和CDK4的表达,过表达IGFBP7的作用相反(P均<0.01)。裸鼠移植瘤模型实验发现过表达IGFBP7组的裸鼠种植瘤的体积与质量均小于对照组[(773.50±113.45) mm3比(1 038.75±101.31) mm3,(786±50) mg比(1 145±85) mg,t=7.799、16.280,P均<0.01]。

结论

IGFBP7能够影响胃癌细胞的增殖及细胞周期,并影响细胞周期素D1和CDK4的表达,可抑制裸鼠移植瘤的生长。

其他文献
今年8月6日下午3时左右,戴松年叔叔的夫人沈洁阿姨来电,说戴叔叔已经于中午时分去世,我顿时悲痛万分。尽管在前段时间得知他病重住院的消息,我也曾提出到医院去看望老人家,但沈洁阿姨说因疫情影响,外人不得入院探视,我只能作罢。虽然戴叔叔91岁病逝,也算高龄,今天我提笔撰写缅怀他老人家的纪念文章,心情依然悲痛。  戴松年出生在括苍山区的永嘉县岩坦镇闪坑村。早在上世纪30年代初,中国工农红军第十三军在永嘉县
期刊
2型糖尿病是以慢性高血糖为特征的终身性代谢性疾病,目前虽然无法根治,但可以通过某些治疗方式达到"缓解"——即无需用药而血糖正常状态。2009年美国糖尿病学会(ADA)专家共识及2012年ADA糖尿病医学诊疗标准中提出了2型糖尿病缓解的定义和标准。迄今国内外对2型糖尿病缓解的标准、时间等尚未统一。本文对2型糖尿病缓解治疗的定义与标准、缓解机制、手段及影响因素进行综述,根据缓解机制提出新三联缓解治疗策
目的从基因水平探讨糖化低密度脂蛋白(LDL)对血管内皮细胞的作用。方法用20 mmol/L葡萄糖将2 mg/ml LDL在37℃无菌抗氧化条件下孵育4周完成糖化,然后用完全培养基及0.1 mmol/L糖化LDL(gly-LDL)处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs)24 h,设普通LDL(n-LDL)组和空白对照组,提取总RNA,进行数字表达谱分析(DGE),并选取部分基因进行实时定量PCR(q-P
期刊
习近平总书记在建党百年华诞庆祝大会上,以“9个必须”阐述了以史为鉴、开创未来的基本经验。其中第二个“必须”,强调了江山就是人民,人民就是江山。  前些时候,中央电视一台播放电视连续剧《大决战》。毛泽东深情地说到,淮海战役的关键,人民起了决定性作用;解放军战士和支前群众是“1:9”,即1名解放军,9名支前人。陈毅后来也说:“淮海战役的胜利,是人民群众用小车推出来的。”  史料记载,淮海战役时,苏、鲁
期刊
目的探讨新疆乌鲁木齐市三家医院妊娠妇女的甲状腺激素水平的变化及妊娠期甲状腺疾病的发病率。方法将792例妊娠妇女按照孕周分为早期妊娠(A1组)234例,中期妊娠(A2组)256例,晚期妊娠(A3组)302例,另选取200例非妊娠健康妇女作为对照组(N组),应用电化学发光方法检测血清促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲酰原氨酸(FT3)、游离甲状腺激素(FT4)及TT3、TT4,甲状腺球蛋白抗体(TGA
目的揭示长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)Co7Rik的表达特征及其在肝脏糖异生中的潜在作用。方法建立饥饿-再进食动物模型、高脂饮食诱导的肥胖模型,qPCR法检测LncRNA-Co7Rik表达变化;分离C57BL/6J小鼠不同部位组织,检测其组织表达规律。原代分离小鼠肝脏原代细胞,分别给予二丁酰环腺苷酸(db-cAMP)、Forskolin、地塞米松、Hydr
期刊
浙江省仙居县淡竹乡位于国家5A级景区——神仙居景区的核心区域,是典型的以林业为主的山区乡。通过大力发展民宿,2020年,淡竹乡接待游客超300万人次,平均每家民宿收入15万元,经济获得长足发展。  类似事例,在全国不是少数。例如,贵州省遵義市播州区花茂村曾是山区贫困村,通过发展乡村旅游,村民们过上了小康生活,成为远近闻名的富裕村。江苏省溧阳市李家园村,过去一亩竹林每年产出两三千元,通过开展挖笋等旅
期刊
期刊