【摘 要】
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目的检测肺腺癌转移相关转录本1 （MALAT-1）在人卵巢癌细胞株中的表达，并探讨shRNA介导沉默MALAT-1表达对卵巢癌细胞OVCAR3生物学功能的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测ES-2、SKOV3、OVCAR3、A2780 4株卵巢癌细胞中MALAT-1mRNA水平的表达差异，设计构建4条特异性干扰MALAT-1表达的shRNA-pGPU6/GFP/Neo表达
【机 构】
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510150 广州医科大学附属第三医院妇产科广东省产科重大疾病重点实验室,510150 广州医科大学附属第三医院妇产科广东省产科重大疾病重点实验室,510150 广州医科大学附属第三医院妇产科广东省产
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目的检测肺腺癌转移相关转录本1 （MALAT-1）在人卵巢癌细胞株中的表达，并探讨shRNA介导沉默MALAT-1表达对卵巢癌细胞OVCAR3生物学功能的影响。
方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测ES-2、SKOV3、OVCAR3、A2780 4株卵巢癌细胞中MALAT-1mRNA水平的表达差异，设计构建4条特异性干扰MALAT-1表达的shRNA-pGPU6/GFP/Neo表达载体和一条不干扰任何基因表达的空载体作为阴性对照，转染高表达MALAT-1的OVCAR3细胞，qRT-PCR筛选并鉴定有效沉默MALAT-1的shRNA序列。应用CCK-8比色法、体外黏附与划痕实验、Transwell迁移及侵袭实验检测MALAT-1沉默后OVCAR3细胞生长增殖、黏附、划痕修复、迁移及侵袭能力的改变。
结果筛选出高表达MALAT-1的OVCAR3细胞株，有效沉默MALA-1基因后，OVCAR3细胞株的增殖、划痕修复能力明显抑制，黏附能力有不同程度降低。Transwell迁移实验中，干扰组转入底层膜细胞数量为（52.17±4.48）个，低于阴性对照组的（286.50±12.23）个和空白对照组的（295.67±6.96）个；在Transwell侵袭实验中，干扰组转入底层膜细胞数为（37.33±2.40）个，低于阴性对照组的（239.00±15.72）个和空白对照组的（222.67±20.85）个，干扰组与对照组比较差异有统计学意义（P<0.001）。
结论利用shRNA介导沉默MALAT-1的表达可以有效抑制卵巢癌细胞株OVCAR3的增殖、黏附、划痕修复以及迁移、侵袭能力，MALAT-1有望成为卵巢癌治疗的有效靶基因。
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