【摘 要】
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目的 建立四价流感病毒裂解疫苗中Triton X-100残留量高效液相色谱(high performance liquid chromatogra-phy,HPLC)检测方法,对方法进行验证,并与比浊法进行对比.方法 对HPL
【机 构】
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辽宁成大生物股份有限公司研发部,辽宁沈阳110179
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目的 建立四价流感病毒裂解疫苗中Triton X-100残留量高效液相色谱(high performance liquid chromatogra-phy,HPLC)检测方法,对方法进行验证,并与比浊法进行对比.方法 对HPLC法的流动相比例(水∶甲醇=30∶70、20∶80、10∶90)、流速(1.0、1.2、1.4 mL/min)、进样量(5、10、20 μL)进行筛选,确定HPLC法的色谱条件.对HPLC法和比浊法分别进行验证,并对两种方法进行对比.结果 HPLC法的色谱条件为:采用BDS HYPERSIL C18色谱柱(250 mm × 4.6 mm,5μm);流动相:超纯水∶甲醇=20∶80;流速:1.2 mL/min;检测波长:230 nm;进样量:10 μL;柱温:30℃.HPLC法中,Triton X-100色谱峰与杂质分离良好,在2～ 100 μg/mL范围内线性关系良好,r为0.9999;检测限为l μg/mL,定量限为2μg/mL,准确性和精密性良好.采用比浊法检测时,标准品在10 ～ 100 μg/mL范围内线性关系良好,r为0.9965,定量限为10 μg/mL.结论 与比浊法相比,HPLC法更适用于四价流感病毒裂解疫苗中Triton X-100残留量的测定.
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