改良前房注射法移植血管内皮细胞替代角膜内皮细胞的实验观察

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目的 探讨血管内皮细胞(VEC)移植治疗角膜内皮损伤的可行性.方法 实验研究.体外培养增殖VEC.将恒河猴12只,按照随机数字表随机分为两组:实验组(6只)、对照组(6只).实验组通过超声乳化破坏角膜内皮细胞层之后,将体外培养的VEC利用前房注射法移植到恒河猴角膜内表面;对照组超声乳化破坏角膜内皮细胞层后不注射VEC.术后7、14、30、60、90 d分别行术眼前节照相;术前及术后7、14、30、60、90 d分别用A超测量角膜厚度、Goldman眼压计测量眼压,对数据进行独立样本t检验及方差分析;术后30、60、90 d分别摘取术眼行病理切片HE染色、扫描电镜观察VEC在角膜植片内表面的分布.结果 实验组角膜比对照组有较好的透明度,未出现大泡性角膜病变,术后3个月时实验组角膜缘可见少量新生血管.术眼前房深度均正常;术后3个月时,实验组角膜厚度为(500±14) μm,明显低于对照组角膜厚度[(618±11)μm],同时期实验组和对照之间角膜植片厚度值变化差异有统计学意义(术后1、2、3个月t值分别为-3.256、-4.419、-12.896,均P<0.05);同时期实验组和对照之间眼压变化差异无统计学意义(术后1、2、3个月t值分别为-1.179、-2.166、-2.536,均P>0.05);实验组角膜内表面可见细胞层;对照组角膜内表面未见细胞样结构.扫描电镜:实验组角膜植片内表面可见VEC分布均匀,生长良好,呈不规则多边形,表面可见微绒毛,VEC间可见少量白细胞,小梁网处部分细胞碎片聚集;对照组角膜内表面呈纤维物质样,未见细胞生长.结论 超声乳化法能很好的建立恒河猴角膜内皮损伤模型;前房注射法能够将VEC移植到角膜内表面,且细胞能在撕出后弹力层的角膜内表面生长,并在一定程度上发挥屏障作用维持角膜的脱水状态和透明性.移植手术对前房角的组织结构形态在短期内不产生病理性影响。

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