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摘 要：通过对野韭菜组织培养过程中外植体及激素配比的研究，建立野韭菜植株再生体系。结果表明，根尖外植体最适合野韭菜离体培养，MS+0.2mg/L 2，4-D+0.5mg/L ZT为最佳愈伤组织培养基，MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA+0.5mg/L ZT为最佳不定芽分化培养基，MS+0.1mg/L NAA为生根培养基，移栽成活率达98%以上。
关键词：野韭菜;组织培养;外植体;快速繁殖
中图分类号 S633.3;S604+.3 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2021）11-0036-02
Tissue Culture and Rapid Propagation of Wild Chinese Chive
YE Qinglei1 et al.
（1Heilongjiang Agricultural Technology Extension Station，Harbin 150090， China）
Abstract： Regeneration System of wild Chinese chive is established by studying the ratio of explant and hormones in the process of tissue culture. Research shows that the apical explant is most suitable for in vitro culture of wild Chinese chive， MS+0.2mg/L 2， 4-D+0.5mg/L ZT is the best medium for callus，MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA+0.5mg/L ZT is the best medium for the differentiation of adventitious buds， MS+0.1mg/L NAA is used as rooting medium， the survival rate of transplanting is more than 98%.
Key words： Wild Chinese chive;Tissue culture;Explant;Rapid propagation
野韭菜別名岩葱、观音菜、山韭菜、宽叶韭等，属百合科葱属多年生草本植物，主要生长在海拔400m以上的山区。野韭菜富含多种营养元素，是一种营养保健型野生蔬菜，具有很好的食疗价值，可作馅、炒食或汤用[1-2]，但产量极少，普通菜市场上鲜有出售。为此，笔者通过研究野韭菜组培技术，建立野韭菜植株再生体系，为野韭菜的快速繁殖及产量和商品价值的提升提供有效途径。
1 材料与方法
1.1 材料 山区采集的野韭菜。
1.2 方法
1.2.1 无菌外植体的制备 野韭菜采回后用流水冲洗干净，分别切取根、叶和子房0.3～0.6cm的组织，放入75%酒精中浸泡约50s，再用0.1% HgCl2溶液消毒2min，之后用无菌水冲洗3次，再用灭菌滤纸吸干水分，作为接种的外植体[3]。
1.2.2 愈伤组织诱导、芽分化及生根培养 以MS培养基为基本培养基，加7g/L琼脂粉（Agar）和30g/L蔗糖，pH 5.8。愈伤组织诱导、芽分化及生根培养基中添加不同浓度的2，4-D、ZT、6-BA、IAA或NAA（见表1）。将无菌外植体接种于不同激素配比的培养基上（图1），25d后观察记录愈伤组织诱导情况。将愈伤组织切成小块后接种于不定芽分化培养基上，20d后观察记录不定芽分化情况。将不定芽切下，然后接种于生根培养基上，25d后观察记录生根情况。培养条件：温度25℃，光照12h/d，光照强度1500～2000Lx。
愈伤诱导率（%）=产生愈伤组织的外植体数/接种外植体数×100[4]
分化率（%）=产生不定芽的外植体数/接种愈伤组织块数×100
生根率（%）=长根的不定芽数/接种芽数×100[5]
2 结果与分析
2.1 不同激素配比对野韭菜外植体愈伤组织诱导、不定芽分化及生根的影响 由表1可知，野韭菜叶片组织不能诱导出愈伤组织，子房组织愈伤诱导率非常低，根尖组织最适合野韭菜离体培养，最佳愈伤组织培养基A1为MS+0.2mg/L 2，4-D+0.5mg/L ZT，愈伤组织诱导率达62.6%;最佳不定芽分化培养基B1为MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA+0.5mg/L ZT，不定芽分化率达83.3%;生根培养基C1为MS+0.1mg/L NAA，生根率为100%。
2.2 野韭菜继代苗根尖组织培养再生植株 野韭菜继代苗在C1生根培养基上诱根产生，根长1.0～4.0cm时（图2A），切下0.5～1cm的根尖转接于A1愈伤组织诱导培养基上（图2B），长出愈伤后再在B1培养基上进行诱芽分化（图2C、D），可以得到较高的出愈率和不定芽分化率。不定芽转接到生根培养基（图2E、F），在生根培养20～30d后，将其移至基质中，用保鲜膜覆盖保湿，5d后将保鲜膜去除，幼苗成活率达98%以上（图2G）。
3 结论与讨论
本试验以山区采集的野韭菜为研究对象，研究不同激素组合对野韭菜叶片、子房及根尖组织的愈伤诱导及不定芽分化的影响。结果表明，愈伤诱导和不定芽分化的最佳培养基分别为MS+0.2mg/L 2，4-D+0.5mg/L ZT和MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA+0.5mg/L ZT，生根最适培养基为MS+0.1mg/L NAA，组培苗经驯化移栽后成活率达98%。通过野韭菜根尖组织培养再生植株，可以解决野韭菜的保存与快速繁殖问题。
参考文献
[1]刘朝安，曾文丹，武鹏，等.野韭菜的植物学特性及其栽培技术[J].北方园艺，2013，13：211.
[2]万正林，黄雄彪，龙明华，等.野韭菜水培栽培技术[J].北方园艺，2014，19：55-56.
[3]王桂英.韭菜根尖培养及植株再生[J].北方园艺，2007，12：199-200.
[4]王茜.建立野韭菜离体培养体系的研究[D].西宁：广西大学，2015.
[5]高行英.韭菜根再生体系建立及遗传转化相关因素研究[D].晋中：山西农业大学，2013.
（责编：徐世红）
关键词：野韭菜;组织培养;外植体;快速繁殖
中图分类号 S633.3;S604+.3 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2021）11-0036-02
Tissue Culture and Rapid Propagation of Wild Chinese Chive
YE Qinglei1 et al.
（1Heilongjiang Agricultural Technology Extension Station，Harbin 150090， China）
Abstract： Regeneration System of wild Chinese chive is established by studying the ratio of explant and hormones in the process of tissue culture. Research shows that the apical explant is most suitable for in vitro culture of wild Chinese chive， MS+0.2mg/L 2， 4-D+0.5mg/L ZT is the best medium for callus，MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA+0.5mg/L ZT is the best medium for the differentiation of adventitious buds， MS+0.1mg/L NAA is used as rooting medium， the survival rate of transplanting is more than 98%.
Key words： Wild Chinese chive;Tissue culture;Explant;Rapid propagation
野韭菜別名岩葱、观音菜、山韭菜、宽叶韭等，属百合科葱属多年生草本植物，主要生长在海拔400m以上的山区。野韭菜富含多种营养元素，是一种营养保健型野生蔬菜，具有很好的食疗价值，可作馅、炒食或汤用[1-2]，但产量极少，普通菜市场上鲜有出售。为此，笔者通过研究野韭菜组培技术，建立野韭菜植株再生体系，为野韭菜的快速繁殖及产量和商品价值的提升提供有效途径。
1 材料与方法
1.1 材料 山区采集的野韭菜。
1.2 方法
1.2.1 无菌外植体的制备 野韭菜采回后用流水冲洗干净，分别切取根、叶和子房0.3～0.6cm的组织，放入75%酒精中浸泡约50s，再用0.1% HgCl2溶液消毒2min，之后用无菌水冲洗3次，再用灭菌滤纸吸干水分，作为接种的外植体[3]。
1.2.2 愈伤组织诱导、芽分化及生根培养 以MS培养基为基本培养基，加7g/L琼脂粉（Agar）和30g/L蔗糖，pH 5.8。愈伤组织诱导、芽分化及生根培养基中添加不同浓度的2，4-D、ZT、6-BA、IAA或NAA（见表1）。将无菌外植体接种于不同激素配比的培养基上（图1），25d后观察记录愈伤组织诱导情况。将愈伤组织切成小块后接种于不定芽分化培养基上，20d后观察记录不定芽分化情况。将不定芽切下，然后接种于生根培养基上，25d后观察记录生根情况。培养条件：温度25℃，光照12h/d，光照强度1500～2000Lx。
愈伤诱导率（%）=产生愈伤组织的外植体数/接种外植体数×100[4]
分化率（%）=产生不定芽的外植体数/接种愈伤组织块数×100
生根率（%）=长根的不定芽数/接种芽数×100[5]
2 结果与分析
2.1 不同激素配比对野韭菜外植体愈伤组织诱导、不定芽分化及生根的影响 由表1可知，野韭菜叶片组织不能诱导出愈伤组织，子房组织愈伤诱导率非常低，根尖组织最适合野韭菜离体培养，最佳愈伤组织培养基A1为MS+0.2mg/L 2，4-D+0.5mg/L ZT，愈伤组织诱导率达62.6%;最佳不定芽分化培养基B1为MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA+0.5mg/L ZT，不定芽分化率达83.3%;生根培养基C1为MS+0.1mg/L NAA，生根率为100%。
2.2 野韭菜继代苗根尖组织培养再生植株 野韭菜继代苗在C1生根培养基上诱根产生，根长1.0～4.0cm时（图2A），切下0.5～1cm的根尖转接于A1愈伤组织诱导培养基上（图2B），长出愈伤后再在B1培养基上进行诱芽分化（图2C、D），可以得到较高的出愈率和不定芽分化率。不定芽转接到生根培养基（图2E、F），在生根培养20～30d后，将其移至基质中，用保鲜膜覆盖保湿，5d后将保鲜膜去除，幼苗成活率达98%以上（图2G）。
3 结论与讨论
本试验以山区采集的野韭菜为研究对象，研究不同激素组合对野韭菜叶片、子房及根尖组织的愈伤诱导及不定芽分化的影响。结果表明，愈伤诱导和不定芽分化的最佳培养基分别为MS+0.2mg/L 2，4-D+0.5mg/L ZT和MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA+0.5mg/L ZT，生根最适培养基为MS+0.1mg/L NAA，组培苗经驯化移栽后成活率达98%。通过野韭菜根尖组织培养再生植株，可以解决野韭菜的保存与快速繁殖问题。
参考文献
[1]刘朝安，曾文丹，武鹏，等.野韭菜的植物学特性及其栽培技术[J].北方园艺，2013，13：211.
[2]万正林，黄雄彪，龙明华，等.野韭菜水培栽培技术[J].北方园艺，2014，19：55-56.
[3]王桂英.韭菜根尖培养及植株再生[J].北方园艺，2007，12：199-200.
[4]王茜.建立野韭菜离体培养体系的研究[D].西宁：广西大学，2015.
[5]高行英.韭菜根再生体系建立及遗传转化相关因素研究[D].晋中：山西农业大学，2013.
（责编：徐世红）