【摘 要】
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目的建立KRAS基因突变高分辨率熔解曲线分析法（high resolution melting,HRM）检测方法,确立最佳反应体系和反应条件,为将此技术用于临床基因突变的快速检测奠定基础。方法根据
【机 构】
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南方医科大学研究生学院,广州军区广州总医院医学实验科
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目的建立KRAS基因突变高分辨率熔解曲线分析法（high resolution melting,HRM）检测方法,确立最佳反应体系和反应条件,为将此技术用于临床基因突变的快速检测奠定基础。方法根据引物Tm值设立退火温度梯度,确定适宜的退火温度。利用正交实验,对影响实时荧光定量PCR（qPCR）-HRM反应体系的模板DNA、Mg2＋、引物等3种主要因素进行优化。通过对SW480和MDA-MB-231细胞基因组DNA进行HRM分析检测突变,并直接测序验证,观察反应体系和反应条件的可行性。结果引物最适退火温度为
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