目的 建立稳定过表达BDNF和NT-3基因的脂肪干细胞系并探讨其意义。方法 采用胶原酶消化联合差速贴壁法获取脂肪干细胞,向成骨方向诱导2周、4周后,行碱性磷酸酶染色和茜素红染色。采用Lenti-BDNF-GFP重组慢病毒液和Lenti-NT-3-RFP重组慢病毒液转染第3代脂肪干细胞,确定最佳感染复数值,按照最佳感染复数值感染脂肪干细胞,建立稳定过表达BDNF和NT-3基因的脂肪干细胞系。结果 成功分离和培养的大鼠脂肪干细胞具有多向分化潜能,向成骨方向诱导后,碱性磷酸酶和茜素红染色呈阳性。Lenti-BDNF-GFP重组慢病毒液和LentiNT-3-RFP重组慢病毒液转染脂肪干细胞的最佳感染复数值为100,感染时间72h,共转染组BDNF和NT-3在基因水平和蛋白水平均呈稳定高表达。结论 稳定过表达BDNF和NT-3基因的脂肪干细胞系的建立对于脊髓损伤的治疗有着重要意义,可以解决脂肪干细胞移植治疗脊髓损伤过程中神经因子分泌数量少和半衰期短等问题,这对进一步研究脊髓损伤的修复机制有着重要意义。