【摘 要】
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谷胱甘肽作为体内主要的内源性抗氧化剂,在医药、食品、化妆品行业有重要的应用价值.以嗜热链球菌CICC20174为模板,扩增出双功能的γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶/谷胱甘肽合成酶基
【基金项目】
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大学生创新创业训练项目（201610606029）
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谷胱甘肽作为体内主要的内源性抗氧化剂,在医药、食品、化妆品行业有重要的应用价值.以嗜热链球菌CICC20174为模板,扩增出双功能的γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶/谷胱甘肽合成酶基因gsh F.插入表达载体p EASY-E1,转化大肠杆菌BL21（DE3）,筛选出重组克隆.经过IPTG诱导,重组大肠杆菌菌体超声波破碎、镍柱亲和层析纯化后,SDS-PAGE显示一条85k Da的蛋白条带,与理论值相符.重组酶Gsh F可将谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸催化生成谷胱甘肽,重组大肠杆菌的胞内酶活为5.85U/L,比活力为0.
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