【摘 要】
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目的建立癫痫持续状态(status epilepticus，SE)大鼠模型，探讨大麻素2型受体(cannabinoid receptor type 2，CB2R)对自噬相关蛋白LC3、Beclin-1表达的影响。方法SD大鼠随机分为4组：对照组，癫痫组(Epilepsy组)，CB2R激动剂JWH-133组(Epilepsy＋JWH-133组)，CB2R拮抗剂AM630组(Epilepsy＋AM63
【机 构】
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中国医科大学附属盛京医院小儿神经内科，沈阳 110004,中国医科大学附属盛京医院小儿神经内科，沈阳 110004,中国医科大学附属盛京医院小儿神经内科，沈阳 110004,
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目的建立癫痫持续状态(status epilepticus，SE)大鼠模型，探讨大麻素2型受体(cannabinoid receptor type 2，CB2R)对自噬相关蛋白LC3、Beclin-1表达的影响。
方法SD大鼠随机分为4组：对照组，癫痫组(Epilepsy组)，CB2R激动剂JWH-133组(Epilepsy＋JWH-133组)，CB2R拮抗剂AM630组(Epilepsy＋AM630组)。采用腹腔注射氯化锂-匹鲁卡品的方法建立SE模型。匹鲁卡品腹腔注射前1 h各组大鼠经侧脑室注射等量不同药物，对照组及Epilepsy组注射二甲基亚砜，Epilepsy＋JWH-133组注射JWH-133，Epilepsy＋AM630组注射AM630，在SE后24 h，观察各组大鼠癫痫症状学表现，采用HE染色观察各组大鼠海马CA1区神经元数量变化，应用双重免疫荧光和Western blot技术检测各组大鼠海马CA1区自噬相关蛋白LC3和Beclin-1表达的变化。
结果大鼠癫痫症状学观察显示：对照组无明显癫痫发作，Epilepsy组大鼠的抽搐潜伏期为(13.50±0.61)min，抽搐强度评分为(4.33±0.47)分；Epilepsy＋JWH-133组的抽搐潜伏期为(19.33±0.42)min，较Epilepsy组明显延长(P<0.05)；Epilepsy＋JWH-133抽搐强度评分为(3.33±0.59)分，较Epilepsy组低(P<0.05)，而Epilepsy＋AM630组的作用正好相反。HE染色结果显示：Epilepsy组大鼠海马CA1区神经元数量明显减少，与Epilepsy组相比，Epilepsy＋JWH-133组神经元数量明显增多(P<0.05)，而Epilepsy＋AM630组神经元数量明显减少(P<0.05)。免疫荧光及蛋白印迹结果显示：LC3和Beclin-1主要表达在神经元，Epilepsy组大鼠各组LC3和Beclin-1的表达均比对照组升高(P<0.05)，与Epilepsy组相比，Epilepsy＋JWH-133组LC3和Beclin-1的表达升高更明显(P<0.05)，而Epilepsy＋AM630组的LC3和Beclin-1的表达降低(P<0.05)。
结论在SE后神经元损伤修复的早期阶段CB2R对海马神经元的自噬活动可能产生影响，暗示CB2R可能成为癫痫治疗的一个潜在靶点。
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