高迁移率蛋白1的小干扰RNA对高糖环境下视网膜血管内皮细胞凋亡的影响

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目的探讨高迁移率蛋白1(high-mobility group box-1,HMGB1)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对视网膜血管内皮细胞的影响。方法采用siRNA对HMGB1的表达进行抑制,采用CCK8检测试剂盒、Hochest33342染色、流式细胞仪检测,观察高糖环境下HMGB1 siRNA对视网膜血管内皮细胞的影响,同时通过Western blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果 HMGB1转染后,siRNA组的蛋白表达与正常对照组相比减少了73%(P<0.05),siRNA组的蛋白表达与非特异性siRNA(scr-siRNA)组相比减少了75%(P<0.05),而正常对照组和scr-siRNA组之间差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞仪检测结果显示,正常对照组、高糖组、scr-siRNA组和siRNA组细胞的总凋亡率分别为(0.40±0.03)%、(49.80±3.50)%、(47.60±1.98)%和(23.60±2.40)%。与正常对照组相比,高糖组、scr-siRNA组、siRNA组的细胞凋亡率均明显升高(均为P<0.05);与scr-siRNA组相比,siRNA组的细胞凋亡率明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);而scr-siRNA组和高糖组的细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。与正常对照组相比,高糖组和scr-siRNA组的cleaved-caspase 3蛋白(半胱天冬酶3)表达分别增加了(233±10)%、(266±22)%(均为P<0.05);与scr-siRNA组相比,siRNA组的cleaved-caspase 3蛋白表达减少了(43±3)%(P<0.05);而高糖组和scr-siRNA组的蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。与正常对照组相比,高糖组和scr-siRNA组的B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白表达分别减少了(32±2)%、(29±3)%(均为P<0.05);与scr-siRNA组相比,siRNA组的Bcl-2蛋白表达增加了(42±2)%(P<0.05);而高糖组和scr-siRNA组的蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HMGB1 siRNA可以通过抑制cleaved-caspase 3的活化和增加Bcl-2蛋白的表达减轻高糖环境下视网膜血管内皮细胞的凋亡。
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