【摘 要】
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目的 探究LncRNA ZBED3-AS1调控miR-339-5p/Notch 1在骨质疏松大鼠成骨细胞增殖分化中的作用.方法 构建假手术(Sham)组和模型(Model)组大鼠模型,对大鼠的骨密度进行检查观测
【机 构】
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湖州市中心医院外科 313000;湖州市中心医院骨外科 313000;湖州市中心医院精准医学临床研究中心 313000
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目的 探究LncRNA ZBED3-AS1调控miR-339-5p/Notch 1在骨质疏松大鼠成骨细胞增殖分化中的作用.方法 构建假手术(Sham)组和模型(Model)组大鼠模型,对大鼠的骨密度进行检查观测大鼠建模情况.分离大鼠成骨细胞,qRT-PCR检测细胞中ZBED3-AS1、miR-339-5p的表达.对Sham组和Model组大鼠成骨细胞进行分组后转染.CCK8、茜素红(AR-S)染色、碱性磷酸酶(ALP)染色检测各组细胞增殖分化能力.FISH实验测定ZBED3-AS1在细胞中的分布.双荧光素酶报告证实ZBED3-AS1与miR-339-5p及miR-339-5p和Notch 1之间的关系.Western blot检测Notch通路相关因子的表达.结果 检测股骨骨密度发现,Model组大鼠骨密度明显低于Sham组大鼠(P=0.0 057).与Sham组大鼠比较,Model组大鼠成骨细胞中ZBED3-AS1呈低表达,而miR-339-5p呈高表达(均P＜0.05).过表达ZBED3-AS1能促进成骨细胞的增殖分化;而敲减ZBED3-AS1则能抑制成骨细胞增殖分化(均P＜0.05).ZBED3-AS1作为ceRNA调控miR-339-5p(均P＜0.05).过表达miR-339-5p能抑制成骨细胞的增殖分化能力,而该作用可被ZBED3-AS1过表达部分挽救.Notch 1被证实为miR-339-5p的作用靶点,且干预ZBED3-AS1/miR-339-5p的表达能影响Notch 1的蛋白表达,ZBED3-AS1/miR-339-5p对成骨细胞的调控可能是通过Notch通路实现的.结论 ZBED3-AS1能作为ceRNA调控miR-339-5p,进而影响骨质疏松大鼠成骨细胞增殖分化.
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